某规模化猪场猪瘟血清抗体水平检测研究

摘 要 在吉林省长春市对某规模化猪场的猪瘟抗体水平检测、仔猪不同免疫程序下的抗体水平差异和仔猪母源抗体消长规律分析,制定出一份适合该猪场非典型猪瘟的综合防控建议与对策,并在猪场进行推广应用。 猪瘟血清抗体水平检测:对某规模化猪场进行现场调查,随机对被调
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  摘 要   
  在吉林省长春市对某规模化猪场的猪瘟抗体水平检测、仔猪不同免疫程序下的抗体水平差异和仔猪母源抗体消长规律分析,制定出一份适合该猪场非典型猪瘟的综合防控建议与对策,并在猪场进行推广应用。
  
  猪瘟血清抗体水平检测:对某规模化猪场进行现场调查,随机对被调查猪场不同生长阶段的猪采血,用猪瘟病毒 ELISA 试验进行猪瘟抗体检测。该猪场的猪群未出现阴性病例,免疫效果良好;怀孕母猪的抗体有效阻断力最高,达 68%;育肥肉猪阳性和有效阻断均占 45%;哺乳母猪有效阻断的比例相对降低;哺乳仔猪携带有母源抗体,有效阻断率达 56%。规模化猪场稳定生产与持续发展是以该猪场种猪群的稳定性(后备母猪、怀孕母猪和哺乳母猪)为前提,猪场猪瘟控制情况,直接关系到整个猪群的健康状况。
某规模化猪场猪瘟血清抗体水平检测研究   
  仔猪猪瘟母源抗体消长规律研究:仔猪出生后母源抗体水平较高,在 30 日龄之前,母源抗体水平都保持在保护率临界值 80%以上,30 日龄后抗体水平开始降低,抗体水平降低速率随着日龄的增加而加快,当 50 日龄时,仔猪的抗体水平已经降低到了 5%。本试验中设置为仔猪在 25 日龄断奶,所以母源抗体水平在 25 日龄后下降的速度加快,从母源吸收抗体减弱。鉴于猪场的现有情况,如果仔猪不采用超前免疫,25-30 日龄之间为较佳的猪瘟疫苗免疫时间。
  
  不同免疫程序对仔猪猪瘟抗体水平影响:I 组仔猪分别于 0 日龄、40 日龄注射猪瘟兔化弱毒疫苗 1 头份/头,为超前免疫组,II 组仔猪的时间分别于 25 日龄、60 日龄注射猪瘟兔化弱毒疫苗 1 头份/头,为正常免疫组。其他疫苗的免疫程序不变。试验 I 组仔猪样本猪瘟抗体水平随着仔猪日龄的增长,猪瘟抗体水平呈现出逐渐递增趋势,130 日龄的平均阻断率已高达 66.4%,阳性。试验 II 组仔猪在80 日龄前的猪瘟抗体水平呈现出逐步上升趋势,但在 100 日龄后抗体水平逐渐下降,但猪瘟抗体阻断阳性率达到 100%,这说明两种免疫程序均能满足试验猪场预防猪瘟病毒的要求,I 组优于 II 组。
  
  根据本文对某规模化猪场的流行病调查结果,根据猪场的实际情况制定该猪场非典型猪瘟综合防控建议与对策,提高该猪场的猪瘟防控。本文可以为养猪生产实践中防制非典型猪瘟提供理论依据,为控制预防猪瘟提供参考。
  
  关键词:猪瘟;抗体;检测;免疫;防控。
     Abstract   
  The epidemiological analysis of swine fever in Suckling sows, reserve sows,piglets and fattening sows was carried out in a large-scale pig farm in changchun, jilin province. Combined with the monitoring of the antibody level of CSFV in alarge-scale pig farm, the antibody level differences of piglets under different immunization procedures and the fluctuation and growth rules of maternal antibodies of piglets, a comprehensive prevention and control proposal and countermeasures suitable for CSFV in this pig farm were worked out, and the application was promoted in the pig farm.
  
  Monitoring of serum antibody level of CSFV: an on-site investigation was conducted on a large-scale pig farm. Blood samples were collected randomly from pigs at different growth stages of the pig farm under investigation, and the CSFVELISA test was used to detect the antigen of CSFV. No negative cases were found in the pig herd of the pig farm, and the immune effect was good. The antibody of pregnant sows had the highest blocking effect (68%).The positive and effective blocking of fattening pigs were 45%.The effective blocking rate of Suckling sows was relatively reduced. Suckling piglets were found to have maternal antibodies, with an effective blocking rate of 56%.The stable production and sustainable development of large-scale pig farm is based on the stability of the breeding pig herd (reserve sows,pregnant sows and lactating sows) of the pig farm. The control situation of swine fever in the pig farm is directly related to the health status of the whole pig herd.
  
  Piglets swine fever rules of maternal antibody typical in the study: piglet birth stepmother source antibody level is higher, before the age of 30, maternal antibody levels remain in which critical value by more than 80%, antibody levels started to reduce after 30 days of age, the antibody levels drop rate increased with the increase of age, when 50 days of age, the antibody level of piglets is down to 5%.In this experiment, piglets were set to be weaned at the age of 25 days, so the decline rate of maternal antibody level was accelerated after the age of 25 days, and the absorption of antibodies from the maternal source was weakened. In view of the current situation of pig farms, if piglets do not adopt advanced immunization, 25-30 days is a better immunization time for CSFV.
  
  Effect of different immunization procedures on the antibody level of swine fever:piglets in group I were injected with 1 dose of rabbit attenuated vaccine of swine fever at 0 and 40 days of age, respectively, in the advanced immunization group; piglets in group II were injected with 1 dose of rabbit attenuated vaccine of swine fever at 25 and 60 days of age, respectively, in the normal immunization group. The immunization procedures for other vaccines remain unchanged. With the increase of piglets' age, the antibody level of CSFV in group I showed a gradually increasing trend, and the average blocking rate of 130 days was as high as 66.4%, which was positive. The antibody level of piglets in the test group II showed a gradually increasing trend before 80 days of age, but gradually decreased after 100 days of age,but the positive rate of blocking the antibody against CSFV reached 100%, indicating that the two immune programs could meet the requirements of preventing CSFV in the pig farm, and group I was superior to group II.
  
  According to the epidemiological investigation results of a large-scale pig farm in this paper, Suggestions and countermeasures for the comprehensive prevention and control of atypical swine fever in the pig farm were formulated according to the actual situation of the pig farm, so as to improve the prevention and control of swine fever in the pig farm. This paper can provide theoretical basis for the prevention and control of atypical swine fever in pig production practice, and provide reference for the control and prevention of swine fever.
  
  Keywords:CSF;Antibody; Monitoring; Immune; prevention and control。
     前 言   
  吉林省为全力推进率先实现畜牧业现代化,大力发展标准化规模养殖,提高畜禽的饲养水平,加强建设高质量和安全的畜禽育种基地,并促进从自由放养的养殖规模向标准示范转型升级。严格控制动物卫生防疫工作,持续抓好猪传染性疾病的防控工作,大力宣传猪传染性防范知识,实施动物疫病净化计划,推动动物疫病防控从有效控制向逐步净化消灭转变。
  
  猪瘟(Hog cholera,HC),俗称猪霍乱或猪肠瘟,这种高度接触性传染病是由猪瘟病毒(HCV,CSFV)引起的,最早出现在美国,随后很快传播至全世界。
  
  一旦生猪感染猪瘟病毒,为严防病原传播,只能对病猪进行销毁,治愈后的猪只能自产自销,所以过去几十年里,高发的猪瘟病毒导致我国生猪及其产品出口率降低,国际市扬的占有率较低,造成严重的经济损失。
  
  随着我国疫苗防疫事业的不断发展,逐渐攻克猪瘟病毒免疫问题,猪瘟疫苗在规模化猪场进行接种后,显着降低猪瘟发生发病率,效果明显。1954 年,我国首次成功研发猪瘟兔化弱毒株,1956 年,我国开始推广使用自主研发的中国系(C 系)猪瘟兔化弱毒疫苗。从 1957 年起,中国系疫苗免疫效果被国际认可,逐步推广至欧洲、亚洲很多国家,促进欧亚的这些国家的猪瘟得到控制或消灭。但是,近些年来,由于环境、气候等因素,猪瘟病毒也发生变异,并且带毒母猪、动物不规律流动、疫苗储存不当、免疫不当及各种不可控的原因的存在。随着猪瘟病毒的不断变异,我国的逐渐出现 CSFV 非典型猪瘟,病程发展缓慢,不易被发现,出现继发感染或扩散的趋势,直接影响猪场效益,后果不堪设想。
  
  近年来,虽然我国执行了多年的猪瘟强制免疫策略,但是受到诸多因素的制约,导致猪瘟防控压力增大,虽然近年来有关 CSFV 猪瘟的大规模发病鲜有报道,但是,猪瘟病毒的潜在病原依然存在。由此,猪群中母猪群必须经过严格的免疫程序。我国加大畜牧业管控力度,在规模化猪场严格控制动物卫生防疫工作,对猪场工作人员宣传讲解猪传染性防范知识,有效提高猪场猪群的抗体阻断率和抗体阳性率。
  
  因此,在吉林省长春市某规模化猪场开展非典型猪瘟的流行病学调查及分析,了解猪瘟在该规模化猪场的流行情况,仔猪的抗体水平,以期提供有针对性的免疫防控策略,为规模化猪场猪瘟疫苗接种提供理论支撑。
     第一篇 文献综述
  
  第一章 猪瘟的概述。
  
  1.1 猪瘟。

  
  猪瘟(Hog cholera,HC),俗称猪霍乱或烂肠瘟,这种高度接触性传染病是由猪瘟病毒(HCV,CSFV)引起的,急性症状进一步表现为高烧、厌食、嗜睡、结膜炎、呼吸系统症状和便秘伴腹泻,中度和低毒菌株产生一种更难识别为脑脊液的疾病。HC 最早出现在美国,随后很快传播至全世界,也被称为古典猪瘟(Classical Swine Fever,CSFV)。由于其传播范围广,致死率高等特点,给生猪养殖业带来了较大的经济损失,世界各国都对猪瘟十分关注。国际兽医组织(Office International Des Epizooties,OIE)高度重视,将其列入了 A 类或一类,是 16 种法定传染病之一。我国作为畜牧业大国,曾经是猪瘟(HC)流行较为严重的国家之一,国家农业部也按照疫病流行程度及其危害程度,根据国际 OIE的分类标准将其列入了一类疫病范围。
  
  1.2 猪瘟病毒。
  
  猪瘟(HC)的病原体,为猪瘟病毒(CSFV),宿主是生猪和野猪,属于黄病毒科,瘟病毒属。1940 年以来,牛病毒性腹泻、牛粘膜病以及羊边界病这三种反刍动物的疾病被确定为病毒病,且致病病毒与 CSFV 病毒特征相似。根据这些病毒在序列上的同源性及基因组构成的相似性,这些病毒被归类为黄病毒科瘟病毒属[1]。CSFV 的病毒粒子是一种包含糖基化膜蛋白和二十面体核衣壳的包膜,病毒颗粒形状为球形,直径大约为 34~50nm,有不明显的膜粒,一层结合牢固的类脂囊膜,核衣壳可能为二十面体对称,病毒表面包裹有 6~8nm 类似穗样的突起[2]。
  
  CSFV 整个病毒基因组长度大约 12.3 kb,为单链阳性 RNA[3, 4],这个 CSFV的全基因组仅有一个单独的开放式阅读框(ORF),两侧即为 5'和 3'未翻译区域(UTR),猪瘟病毒基因组 5'端非翻译区缺少一个 5'甲基化的“帽子”结构,包含一个内部核糖体进入位点(IRES)[5, 6]。猪瘟病毒(CSFV)3'非编码区不具有任何多聚 A 区。利用宿主翻译机制,ORF 可以编码 3898 个氨基酸的长肽 这种多聚蛋白由宿主信号肽酶和 Npro、NS2 和 NS3 蛋白酶对其进行共翻译和翻译后修饰,最终产生了不同的病毒蛋白[7, 8]。单个的 ORF 被翻译成四个结构(C,Erns,E1,E2),和 8 个非结构的病毒蛋白(Npro,P7,NS2,NS3,NS4A,NS4B,NS5A,NS5B)[9, 10]。
        
  猪瘟病毒的生活史是从宿主细胞的感染开始的,例如隐生的猪的内皮细胞。
  
  猪瘟病毒通过 E1 和 E2 糖蛋白附着在宿主细胞膜上。病毒粒子附着后,病毒可能进入包涵体介导的胞吞作用细胞[11]。糖蛋白在细胞内连续膜融合中起着重要作用,其中 E2 糖蛋白的 129-139 个氨基酸残基被认为是通过 pH 依赖的酸化参与膜融合。单链猪瘟病毒基因组释放到胞质中后,核衣壳蛋白未被包膜,呈阳性,可用于转录和复制[12]。宿主核糖体与猪瘟病毒 RNA 的 5?直接结合并开始翻译,新生多肽链在内质网腔内经过翻译后的修饰和裂解。猪瘟病毒基因组的复制由NS5B 进行,它是一种核糖核酸依赖的 RNA 聚合酶酶,与 NS5B 一起,病毒复制还受到其他非结构蛋白(即 NS3,NS4A,NS4B 和 NS5A)的介导[13]。
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  1.3 猪瘟病毒的传播方式
  1.4 猪瘟的临床症状和病理变化
  1.5 猪瘟的国外流行现状及发病特点
  1.6 猪瘟的国内流行现状及发病特点
  
  第二章 猪瘟疫苗的研究进展
  
  2.1 猪瘟灭活疫苗
  2.2 弱毒疫苗
  2.3 亚单位疫苗
  2.4 基因缺失弱毒疫苗
  
  第二篇 研究内容
  
  第一章 某规模化猪场猪瘟血清抗体水平检测
  

  1.1 材料
  1.2 方法
  1.3 结果
  1.4 讨论
  1.5 小结
  
  第二章 仔猪猪瘟母源抗体消长规律研究
  
  2.1 材料
  2.2 方法
  2.3 结果
  2.4 讨论
  2.5 小结
  
  第三章 不同免疫程序对仔猪猪瘟抗体水平影响
  
  3.1 材料
  3.2 方法
  3.3 结果
  3.4 讨论
  3.5 小结
  
  第三篇 某规模化猪场非典型猪瘟综合防控建议与对策
  
  1 养殖观念的转变
  2 加强免疫监测
  3 科学饲养
  4 做好疫病监测
  5 加强应急处置,确保猪群安全
 
  结 论

  1.猪瘟群体的免疫抗体的阻断效果良好;该猪场定期进行猪瘟控制净化计划,该生产线的种猪群的 CSF 免疫抗体水平大于 50 的阳性率在 80%以上,说明该猪场猪群未出现带毒现象,猪瘟隐性感染风险较低。

  2.建议新生仔猪猪瘟疫苗免疫程序采用超前免疫方式,0 日龄超免、30 日龄二免、70 日龄三免。

  3.确定了本猪场仔猪的母源抗体消长规律的最低临界值的日龄为 30 天;猪场仔猪最佳免疫日龄为 25-30 天之间。

  4.通过本次猪瘟抗体水平检测与分析,为该猪场的科学饲养提供理论依据,有效预防疾病。

  参考文献

    王岩. 吉林省某规模化猪场猪瘟抗体水平检测与分析[D].吉林农业大学,2019. 点击下载全文 转载请注明来源。原文地址:http://www.lw54.com/html/zhlw/20200314/8281985.html   

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